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離心濃縮儀的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)介紹

更新時(shí)間:2024-01-31  點(diǎn)擊次數(shù):3004

離心濃縮儀作為配有抗腐蝕化學(xué)隔膜泵的完整系統(tǒng)的一部分或是作為一個(gè)便于升級(jí)的基本配置,確保高效、平緩地對(duì)您的樣品(如DNA/RNA,蛋白質(zhì))進(jìn)行真空濃縮。對(duì)于許多提供商業(yè)化高通量測(cè)序服務(wù)的實(shí)驗(yàn)室,由于必須濃縮處理大量低濃度DNA樣品,是該款真空離心濃縮儀的“用武之地”。也許有人會(huì)考慮通過(guò)應(yīng)用不同方法(如乙醇沉淀;反復(fù)濃縮以達(dá)到濃縮核酸的目的,但是這種操作既耗時(shí)且損失大量樣品,無(wú)法保障準(zhǔn)確測(cè)序的要求而被此類實(shí)驗(yàn)室挨棄。另外,濃縮干燥DNA樣品也要把握適度原則,否則樣品中濕度過(guò)低,DNA不易重溶,一樣會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的效果。

  離心濃縮儀測(cè)試方法:

  1.再濃縮DNA樣品

  許多時(shí)候,當(dāng)完成循環(huán)測(cè)序通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠分離后,卻發(fā)現(xiàn)結(jié)果不盡如人意,我們首先需要考慮DNA樣品是否濃縮不足?除了通過(guò)比色分析濃度、通過(guò)將樣品溶入少量溶劑濃縮樣品外,推薦您使用5301真空離心濃縮儀再濃縮DNA樣品,通過(guò)加熱60℃與“功能1”命令,僅需30分鐘就可將150ulDNA水溶液濃縮至10ul,而且不影響DNA之后在測(cè)序中的反應(yīng)。相同的參數(shù)條件也可用于測(cè)序中使用的引物濃縮。

  對(duì)于比較敏感的樣品,我們不必機(jī)械地選擇溫度參數(shù),可以適當(dāng)?shù)剡x擇相對(duì)低的溫度,只要相應(yīng)延長(zhǎng)離心濃縮的時(shí)間即可。

  2.去除DNA樣品中的醇?xì)埩?/p>

  無(wú)法對(duì)重溶的DNA樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)序反應(yīng),可能是由于DNA樣品中存在醇污染,通過(guò)5301真空離心濃縮儀加熱60℃與“功能1”命令,4分鐘內(nèi)就可將DNA樣品中的醇?xì)埩羧コ?/p>

  3.分裝酶

  通過(guò)分別稱量分裝小量酶如RNase至微量檢測(cè)管,想來(lái)就是件費(fèi)時(shí)費(fèi)力的工作。為了在每個(gè)微量檢測(cè)管中加入1mg酶,先將100mg酯溶入1ml水中,在多道移液器的幫助下在每個(gè)微量檢測(cè)管中加入10ul酶溶液,接下來(lái)就是5301真空離心濃縮儀的強(qiáng)項(xiàng),45℃與“功能”命令,5分鐘內(nèi)就可將酶溶液中的水份完全蒸發(fā)。